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重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF預裝柱舉例使用

發布時間: 2022-12-28  點擊次數: 844次

重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF預裝柱舉例使用

 

 

相關介紹:

重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF是將重組大消化鏈球菌蛋白L(Recombinant Peptostreptococcus magnus Protein L,簡稱r-PPL)偶聯在高度交聯的瓊脂糖凝膠上的一種親和純化介質。大消化鏈球菌蛋白L(PPL)能與抗體的κ輕鏈結合而不會影響抗體的抗原結合位點,這一特性使其與結合抗體Fc區域的蛋白A、蛋白G相比,能更廣泛地結合各種來源及亞類的抗體。如人類的IgG、IgM、IgA、IgE、IgD,以及含κ輕鏈(人類1、3、4型,小鼠1型)的Fab、scFv等抗體片段。但不能與重鏈、λ輕鏈、κ輕鏈(2型)結合,所以重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF不能純化牛、山羊、綿羊、雞來源的抗體。

 

 

品  名:重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF

英文名:Recombinant Protein L NUPharose Fast Flow, rProtein L NUPharose FF

目錄號:NRPB52L、NRPB52S(預裝柱)

規  格:20 ml,100 ml,1L,1 ml預裝柱,5 ml預裝柱,特殊規格訂制

運  輸:2 ~ 25℃,常壓、避光

貯  存:20%乙醇,2-8℃

 

應用舉例:

結合緩沖液:20 mM磷酸鹽緩沖液(PB),pH 7.4

洗脫緩沖液:0.1 M檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液,pH 2.7

中和緩沖液:1 M Tris-HCl,pH 9.0

1)1 ml重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF預裝柱,用5~10個柱床體積的蒸餾水洗去保存液;

2)用結合緩沖液平衡 5~10個柱床體積;

3)將3 ml小鼠腹水用結合緩沖液稀釋至15 ml,0.45 μm濾膜過濾上樣;

4)用結合緩沖液平衡 5~10個柱床體積至基線;

5)用洗脫緩沖液洗脫抗體,收集洗脫峰,并用中和緩沖液調節其pH至中性;

6)每次使用后再用3~5個柱床體積的洗脫緩沖液再生清洗;

7)SDS-PAGE(圖1)電泳分析洗脫下來的小鼠單抗純度在95%以上。


 

 

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