尿素氮檢測試劑盒測定原理

尿素氮是人體蛋白質代謝的主要終末產物。氨基酸脫氨基產生NH3和CO2，兩者在肝臟中合成尿素，每克蛋白質代謝產生尿素0.3g。尿素中氮含量為28/60，幾乎達一半。通常腎臟為排泄尿素的主要器官，尿素從腎小球濾過后在各段小管均可重吸收，但腎小管內尿流速越快重吸收越少，也即達到了最大清除率。和血肌酐一樣，在腎功能損害早期，血尿素氮可在正常范圍。當腎小球濾過率下降到正常的50%以下時，血尿素氮的濃度才迅速升高。正常情況下，血尿素氮與肌酐之比(BUN/Scr)值約為10.1，高蛋白飲食、高分解代謝狀態、缺水、腎缺血、血容量不足及某些急性腎小球腎炎，均可使比值增高，甚至可達20～30；而低蛋白飲食，肝疾病常使比值降低，此時可稱為低氮質血癥。

在加熱和強酸條件下，尿素氮與二乙酰肟縮合成紅色的聯吖嗪稱之Fearon 反應。根據色澤的深淺可以計算出尿素氮的含量。 

標本：
草酸鹽、肝素或EDTA 抗凝的血漿。血漿中的尿素氮在室溫下可穩定24 小時，而在4～6℃至少穩定7 天。尿液用生理鹽水作1:10～1:50 稀釋后與血漿操作相同。若超出線性范圍，須再稀釋。

注意事項：
1、酸溶液與肟溶液可按等量混勻，用量為2mL，但此混合液只能保存7 天左右。
2、比色前若發現沉淀，則可3500 轉/分離心10 分鐘。
3、顏色太深時，將樣品作適當稀釋，結果再乘以稀釋倍數。
4、重度脂血標本要用除蛋白濾液測定。
5、試劑4℃保存，有效期一年。
6、本法可以在反應完后從反應液中吸取適量（200-300μL），加入到96 孔板中（注意不要引入氣泡），酶標儀520nm下讀數，吸光值代入公式計算。