尿酸(UA)檢測(cè)試劑盒(磷鎢酸比色法)的操作步驟

發(fā)布時(shí)間： 2023-11-30　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1974次

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

尿酸(UA)是人體和動(dòng)物的代謝產(chǎn)物，正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素，含少量尿酸，尿

酸高是人體的嘌呤因代謝發(fā)生紊亂，致使血液中尿酸增多而引起的一種代謝性疾病，體內(nèi)尿

酸每日的生成量和排泄量大約是相等。

尿酸(UA)檢測(cè)試劑盒(磷鎢酸比色法)檢測(cè)原理是樣本中的尿酸在堿性條件下被磷鎢酸

氧化為尿囊素和二氧化碳，磷鎢酸被還原成藍(lán)色化合物——鎢藍(lán)，鎢藍(lán)生成量與尿酸含量呈

正比，通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)定 600~660nm 吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得 UA 含量，該試劑盒

可用于檢測(cè)無(wú)溶血、無(wú)乳糜的血清樣本中尿酸的含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于

臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、蒸餾水或生理鹽水

2、離心管或小試管、離心機(jī)

3、分光光度計(jì)、比色皿

操作步驟(僅供參考)：

1、準(zhǔn)備樣品：從待測(cè)樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血，直接檢測(cè)，如待測(cè)樣本濃度

過(guò)高，可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后檢測(cè)，-20℃凍存。

2、配制 UA 工作試劑：按 UA Assay Buffer：UA 促進(jìn)劑=50：1 的比例混合，即成；4℃

保存 24H 有效。

3、UA 加樣：按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的 UA 濃度過(guò)高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。

5、UA 檢測(cè)：充分混勻，室溫放置 5min，空白管調(diào)零，分光光度計(jì)測(cè)定 630nm 處標(biāo)準(zhǔn)

管、測(cè)定管的吸光度(記為 A 標(biāo)準(zhǔn)、A 測(cè)定)。

計(jì)算：

血清(漿)尿酸(μmol/L)=(A 測(cè)定/A 標(biāo)準(zhǔn))×400

式中：A 測(cè)定=測(cè)定管的吸光度

A 標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度

400=尿酸標(biāo)準(zhǔn)(400μmol/L)

參考區(qū)間：

注意事項(xiàng)：

1、測(cè)定各孔時(shí)各孔溫度均需達(dá)到室溫，否則影響結(jié)果。

2、紅細(xì)胞內(nèi)存在多種非特異性還原物質(zhì)，所以用血清或血漿測(cè)定比用全血好。

3、不宜用草酸鉀作為抗凝劑。

4、顯色后需準(zhǔn)時(shí)測(cè)定，放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易變濁。

5、血清和尿液樣品中的尿酸室溫下可穩(wěn)定 3 天，尿液樣品冷藏后，可引起尿酸鹽沉淀，可調(diào)節(jié) pH 值至 7.5~8.0，并將樣本加熱至 50℃，再行測(cè)定。

6、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：6 個(gè)月有效；4℃運(yùn)輸，4℃保存。

附錄：參考標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：測(cè)定尿酸標(biāo)準(zhǔn)在 400μmol/L 時(shí)，通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定其630nm 吸光度多在 0.1~0.3 之間。測(cè)定尿酸標(biāo)準(zhǔn)在 50、100、200、400、600、800μmol/L 時(shí)吸光度，據(jù)此作出其標(biāo)準(zhǔn)曲線如下：

注意：由于檢測(cè)儀器和操作手法等條件的不同，參考值范圍會(huì)有波動(dòng)，該值僅供參考，對(duì)于要求計(jì)算含量的，可進(jìn)行多點(diǎn)測(cè)定；根據(jù) 測(cè)定經(jīng)驗(yàn)顯示標(biāo)準(zhǔn)品濃度在 25μmol/L 以下，標(biāo)準(zhǔn)品濃度在 600μmol/L 以上，標(biāo)準(zhǔn)曲線會(huì)有偏差。

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